[摘 要] 革蘭氏染色法是細(xì)菌學(xué)中廣泛使用的一種鑒別染色法，1884年由丹麥醫(yī)師、細(xì)菌學(xué)家漢斯·克里斯蒂安·約阿希姆·革蘭氏(Hans Christian Joachim Gram,1853-1938)創(chuàng)立。文章發(fā)表在《世界臨床醫(yī)學(xué)》上，是醫(yī)學(xué)核心期刊投稿論文發(fā)表范文，供同行參考。

　　[關(guān)鍵詞] 革蘭染色法;懸浮法;陰道分泌物

　　細(xì)菌先經(jīng)堿性染料結(jié)晶紫染色，而經(jīng)碘液媒染后，用酒精脫色，在一定條件下有的細(xì)菌紫色不被脫去，有的可被脫去，因此可把細(xì)菌分為兩大類，前者叫做革蘭氏陽性菌(G+)，后者為革蘭氏陰性菌(G—)。為觀察方便，脫色后再用一種紅色染料如堿性蕃紅、稀釋復(fù)紅等進(jìn)行復(fù)染。陽性菌仍帶紫色，陰性菌則被染上紅色。有芽胞的桿菌和絕大多數(shù)的球菌，以及所有的放線菌和真菌都呈革蘭氏正反應(yīng);弧菌，螺旋體和大多數(shù)致病性的無芽胞桿菌都呈現(xiàn)負(fù)反應(yīng)。

　　目的：對比革蘭染色法和懸浮法對陰道分泌物的檢出率，提高陰道分泌物的陽性檢出率。方法：對480例婦科門診患者陰道分泌物同時采用懸浮法和革蘭染色法進(jìn)行檢測。結(jié)果：懸浮法霉菌檢出率為17.3%,滴蟲檢出率為6.25%;革蘭染色法霉菌檢出率為22.7%,滴蟲檢出率為8.54%,淋球菌檢出率為1.04%,線索細(xì)胞檢出率為12.7%。結(jié)論:建議將革蘭染色法作為婦科陰道分泌物常規(guī)檢查項目,特別是高度懷疑的標(biāo)本,更應(yīng)用革蘭染色法進(jìn)行檢測,以提高臨床診治水平。

　　目前，陰道宮頸炎為婦女的一種常見病、多發(fā)病，直接影響婦女的日常工作和生活。國內(nèi)多采用懸浮法檢查陰道分泌物，漏診率高、檢出率低，且不利于建立質(zhì)控[1]。本文對婦科門診480例患者陰道分泌物用革蘭染色法和懸浮法同時進(jìn)行檢測，現(xiàn)報告如下。

　　1 資料與方法

　　1.1 標(biāo)本來源 2004年5月至2005年12月期間，收集本院婦科門診患者陰道分泌物480例，年齡17歲～62歲，平均年齡30歲。

　　1.2 儀器與試劑 日本OLYMPUS光學(xué)顯微鏡;革蘭染液由四川邁克科技有限責(zé)任公司提供。

　　1.3 方法 留取標(biāo)本后30 min內(nèi)保溫送檢，由專人用懸浮法制成1.5 cm～2.0 cm、3.5 cm～4.0 cm的涂片檢查，待干后進(jìn)行革蘭染色(操作按說明書進(jìn)行)并作好標(biāo)記，顯微鏡下先用低倍鏡粗掃有無梨形、圓形、橢圓形或不規(guī)則形疑似滴蟲，換油鏡仔細(xì)辨認(rèn)具有整個胞體紅似粒細(xì)胞核及鞭毛等特征為滴蟲，同時在油鏡下檢查霉菌、淋球菌、線索細(xì)胞等。

　　2 結(jié)果

　　480例標(biāo)本檢查結(jié)果：懸浮法霉菌檢出率為17.3%(83例),滴蟲檢出率為6.25%(30例);革蘭染色法霉菌檢出率為22.7%(109例)，滴蟲檢出率為8.54%(41例)，淋球菌檢出率為1.04%(5例)，線索細(xì)胞檢出率為12.7%(61例)，懸浮法和染色法對滴蟲的檢出率比較差異無顯著性,P>0.05,但染色法檢出率高于懸浮法。懸浮法和染色法對霉菌的檢出率經(jīng)卡方檢驗P<0.05,有顯著意義,染色法對霉菌的檢出率明顯高于懸浮法。另外染色法陽性而懸浮法陰性霉菌26例，滴蟲11例，懸浮法陽性而染色法陰性霉菌2例，滴蟲2例，復(fù)查均為陽性，淋球菌混合滴蟲感染1例。

　　3 討論

　　霉菌、滴蟲及細(xì)菌性陰道宮頸炎是婦科常見病、多發(fā)病，且患者陰道分泌物性狀和臨床表現(xiàn)常無明顯區(qū)別[2]，而陰道分泌物涂片檢查是婦科常規(guī)檢查項目，能直接反映陰道及宮頸是否存在炎癥及感染程度。陰道分泌物檢測方法的改進(jìn)及準(zhǔn)確的結(jié)果判斷為臨床提供重要診斷依據(jù)，使臨床醫(yī)生作到了對癥下藥，避免濫用抗生素，對婦科病的防治具有良好的社會效益和經(jīng)濟(jì)效益[3]，同時使夫妻間的性生活因婦科疾病影響女方性欲得到改善。從本文兩種檢查方法所得結(jié)果來看，革蘭染色法檢出率高于懸浮法，霉菌的檢出率差異有顯著性。據(jù)張妮[4]報道，滴蟲可能因寒冷季節(jié)受溫度影響或標(biāo)本不能即時送檢使活動力減低及清潔度差難與白細(xì)胞區(qū)別，造成懸浮法識別困難;霉菌可因上皮細(xì)胞透明度差而使得懸浮法辨認(rèn)受影響。另外革蘭染色法檢出淋球菌混合滴蟲感染1例，若用懸浮法，則很可能因鏡下白細(xì)胞的移動檢出滴蟲，而忽視白細(xì)胞內(nèi)外革蘭陰性雙球菌的檢測，又因女性淋球菌感染臨床表現(xiàn)不特異或無癥狀[5]，臨床醫(yī)生易根據(jù)檢驗單結(jié)果診斷為單純的滴蟲感染，這樣會給患者造成久治不愈甚至流產(chǎn)、早產(chǎn)[5]等嚴(yán)重后果。懸浮法陽性而染色法陰性霉菌2例，滴蟲2例，復(fù)查均為陽性，這可能與初期檢驗人員的識別能力有關(guān)。綜上所述，革蘭染色法有以下優(yōu)點：一份標(biāo)本可多項目檢查，特別是淋球菌、加德納菌和其他條件致病菌的檢測是懸浮法所不能及的;設(shè)備和技術(shù)條件要求不高，成本低，易普及;查滴蟲時不受季節(jié)溫度的影響;標(biāo)本染色后病原體基本被殺滅，降低了環(huán)境污染;染色標(biāo)本可較長時間保存以便復(fù)查及作為質(zhì)量監(jiān)督，另外可挑選染色好病原體典型的標(biāo)本作為教學(xué)片及送各家醫(yī)院臨檢室進(jìn)行交流，提高對滴蟲、霉菌、淋球菌及線索細(xì)胞等識別有困難的檢驗者的水平。

　　在治療上，大多數(shù)革蘭氏陽性菌都對青霉素敏感(結(jié)核桿菌對青霉素不敏感);而革蘭氏陰性菌則對青霉素不敏感(但奈瑟氏菌中的流行性腦膜炎雙球菌和淋病雙球菌對青霉素敏感)，而對鏈霉素、氯霉素等敏感。所以首先區(qū)分病原菌是革蘭氏陽性菌還是陰性菌，在選擇抗生素方面意義重大。

　　醫(yī)學(xué)核心期刊投稿發(fā)表須知：《世界臨床醫(yī)學(xué)》雜志是由中國國家新聞出版總署和國家科技部批準(zhǔn)在海內(nèi)外公開發(fā)行的傳統(tǒng)醫(yī)藥行業(yè)發(fā)展與學(xué)術(shù)研究綜合性月刊(國內(nèi)統(tǒng)一刊號：CN11-5576國際統(tǒng)一刊號：ISSN1009-3389)。

　　參考文獻(xiàn)：

　　[1] 鄧光貴.用吖啶橙染色法快速檢查陰道分泌物涂片[J].中華醫(yī)學(xué)檢驗雜志，1992，15(4)：225.

　　[2] 李曼輝，宋芳，王輝.陰道分泌物快速染色法與懸滴法比較及質(zhì)控[J].中國現(xiàn)代醫(yī)藥雜志，2005，7(1)：13.

　　[3] 黃共產(chǎn)，翁寶川，馬標(biāo)興.12096例婦科陰道分泌物白帶常規(guī)染色鏡檢結(jié)果分析[J].中國實驗診斷學(xué)，2005，9(5)：815816.

　　[4] 張妮.206例陰道分泌物生理鹽水直接涂片法和染色法的結(jié)果比較分析[J].實用醫(yī)技雜志.2005，12(5)：1119.

　　[5] 邵長庚，趙辨.臨床皮膚病學(xué)[M].江蘇科學(xué)技術(shù)出版社，529.